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公司动态
甲醛法如何测定氨基酸含量?
发布时间:2013-03-05        浏览次数:248        返回列表
一、原理:

     氨基酸是两性电解质,不能直接通过酸碱滴定来计算其含量。但在常温下,甲醛能迅速与氨基酸的氨基结合,生成羟甲基化合物,使上述平衡右移,促使-NH3释放H+,使溶液的酸度增加,滴定终点移至酚酞的变色域内(PH9.0左右)。因此,可用酚酞做指示剂,用标准碱进行滴定。
二、材料与试剂
 
   25ml锥形瓶、3ml微量滴定管、吸管
   0.1M标准甘氨酸溶液:准确称取750ml甘氨酸,溶解后定容至100ml
   0.1M氢氧化钠、酚酞指示剂(0.5%酚酞的50%乙醇溶液)、中性甲醛溶液(在50ml36%-37%分析纯甲醛溶液中加 入   1ml0.1%酚酞乙醇水溶液,用0.1M的氢氧化钠溶液滴定到微红,储于密封的玻璃瓶中。此试剂在临用前配制。如已放置一段时间,则使用前需重新中和。
 
三、操作方法
 
   1、取3个25ml的锥形瓶,编号。向第1、2号瓶内各加入2ml0.1M的标准甘氨酸溶液和5ml水混匀。向3号瓶内加7ml水。然后向3个瓶中各加5滴酚酞指示剂,混匀后各加2ml甲醛溶液,再混匀,分别用0.1M标准氢氧化钠溶液滴定至溶液显微红色。
 
   重复以上实验2次,记录每次每瓶消耗标准氢氧化钠溶液的毫升数。取平均值,计算甘氨酸氨基氮的回收率。甘氨酸氨基氮回收率=实际测得值/加入理论量×100
 
   公式中实际测得量为滴定和二号瓶耗用的标准氢氧化钠溶液的ml数的平均值与三号瓶耗用的标准氢氧化钠溶液的ml之差乘以标准氢氧化钠的摩尔浓度,再乘以14.008。
 
    2ml乘以标准甘氨酸的摩尔浓度再乘以14.008。即为加入理论量的mg数。
 
   2、取未知浓度的甘氨酸溶液2ml,依上述方法进行测定,平行做几份,取平均值。计算每ml甘氨酸溶液中含有氨基氮的mg数。
 
   氨基氮(mg/ml)=(V-V)×M氢氧化钠×14.008/2
 
   式中:V为滴定待测液耗用标准氢氧化钠溶液的平均值
 
   V为滴定对照液(3号瓶)耗用标准氢氧化钠溶液的平均值