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玉米赤霉烯酮(Zen)又称F-2毒素，它首先从有赤霉病的玉米中分离得到。玉米赤霉烯酮其产毒菌主要是镰刀菌属(Fusarium)的菌侏，如禾谷镰刀菌和三线镰刀菌。玉米赤霉烯酮主要污染玉米、小麦、大米、大麦、小米和燕麦等谷物。其中玉米的阳性检出率为45%，含毒量可达到2909mg/kg；小麦的检出率为20%，含毒量为0.364～11.05mg/kg。玉米赤霉烯酮的耐热性较强，110℃下处理1h才被完全破坏。
玉米赤霉烯酮具有雌激素样作用，能造成动物急慢性中毒，引起动物繁殖机能异常甚至死亡，可给畜牧场造成巨大经济损失。玉米赤霉烯酮是玉米赤霉菌的代谢产物。1980年李季伦教授发现植物体内也存在玉米赤霉烯酮。
反应原理
本试剂盒采用直接竞争ELISA方法检测样本中的玉米赤霉烯酮，在微孔条上预包被上偶联抗原，利用抗原与抗体的特异性免疫化学反应的原理来进行的，样本中的玉米赤霉烯酮和微孔条上预包被偶联抗原竞争抗玉米赤霉烯酮抗体，加入酶标记物后，用TMB底物显色，样品中的玉米赤霉烯酮含量与样品的吸光度值呈反比，与标准曲线比较即可得出玉米赤霉烯酮含量。
试剂内容
1、玉米赤霉烯酮酶标板：每条8孔，一板12条。
2、玉米赤霉烯酮标准品溶液：0 ppb、2 ppb、
4 ppb、8 ppb、20 ppb、100 ppb 各一瓶，
1mL/瓶。
3、玉米赤霉烯酮酶结合物：一瓶，13mL/瓶。
4、10倍浓缩洗涤液：一瓶，50mL/瓶。
5、底物液A：一瓶，6mL/瓶。6、底物液B：一瓶，6mL/瓶。
7、终止液：一瓶，6mL/瓶。
试剂套组使用说明
A、注意事项
1. 将待测样品、酶标板、标准品溶液、10倍浓缩洗涤液、酶结合物、5倍样本提取液、底物液A、底物液B、终止液，在25℃环境下，至少回温40分钟。
2. 工作洗涤液配制（用于洗板）
利用蒸馏水将10倍浓缩洗涤液以1:9比例稀释（即1mL 10倍浓缩洗涤液+9mL蒸馏水），即可作为清洗微孔使用的工作洗涤液。（10倍浓缩洗涤液请确实回温后使用，并请检查溶液底部之结晶是否完全溶解。）
3. 10%甲醇溶液配制
准确量取10ml甲醇，加入90ml去离子，即
为10%甲醇溶液。配制好的甲醇溶液请尽
快使用，若用不完请保存于2~8 ℃，请勿
超过一星期。
4．用剩余的测试条孔则放回铝箔袋中干燥
保存，储存于2~8℃冰箱。保质期为12月。
B、未提供设备及试剂：
酶标仪：检测波长450nm,参考波长630nm
样本前处理所需设备及试剂：离心机、天
平、均质器、聚苯乙烯离心管、PH试纸、
甲醇
可调式50μL,100μL, 1000μL 移液枪
C、样品处理：
1、谷物、玉米、饲料（稀释倍数：20）
---取5g具有代表性的样品，用打碎机粉碎成过20目的样品，准确称取1g粉碎后样品；
---加入20ml 10%甲醇水（见配液3），强力振荡10分钟，5000rpm离心10分钟后，取1ml上清液于2ml离心管中；
---用1M HCl或1M NaOH调PH至7-8；
---取50μl进行分析；
注意：当样本检测吸光度值超出标准品范围时，请再次用10%甲醇水稀释，在计算时再乘上响应的稀释倍数即可。
D、操作步骤
1、于适当测试孔分别加入50μL标准溶液
(0、2、4、8、20、100ppb)；
2、在另外的测试孔加入50μL已完成前处
理的样品检测液；
3、再于每一测试孔另再加入100μL酶结合
物，轻敲板子四周，使其充分混合后于
25℃下避光静置40分钟；
4、将测试孔中反应液甩掉，用洗涤工作液
（250μL/孔）洗涤微孔板4-5次，一
次应在吸水纸上拍打以完全除去孔中液
体； 5、于每一测试孔中先加入50μL底物液A，
再加 50μL底物液B，轻敲板子四周，使
其充分混合，于25℃下避光静置15分钟；
6、加入终止液，每一测试孔加入50μL，在
波长450 nm 下检测吸光度值，结果在5min
中内读取；
E、判定 利用Excel将标准品浓度取Log，与相对应吸光值之B/B0（相对于0值标准品吸光值之百分比）做线性回归分析（semi-log），再将待测检体之B/B0值代入，则可推算出待测检体浓度。
F、检测限
本试剂盒的玉米赤霉烯酮（Zearalenone）标准品检测下限为2ppb，此浓度之吸光值与阴性标准溶液（0 ppb）之吸光值有明显的差异。检测上限为100ppb，超出此浓度之检体需经适量稀释后再进行检测。
G、交叉反应率
|
Compound |
Cross-Reactivity（%） |
|
ZEN（玉米赤霉烯酮） |
100 |
|
DON（呕吐毒素） |
<0.1 |
H、样品敏感度及回收率
|
样品 |
检测下限（ppb） |
回收率（%） |
|
谷物、玉米、饲料 |
40 |
60-110 |
I、变异系数(CV%)
试剂盒板内变异系数小于8%，板间变
异系数小于15%。