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· 产品规格： 2份/包
· 产品用途： 食品中大肠菌群的检测
1、原理及适用范围
将乳糖胆盐选择性培养基和TTC显色剂加载在纸片上，经培养后能够在纸片上生长并发酵乳糖产酸的即为大肠菌群阳性，记录每个稀释度大肠菌群阳性纸片数，根据大肠菌群MPN表查出相应的大肠菌群数。 食品大肠菌群检验纸片法与国标法中的九管法相对应，将原来几步的试验简化为一步，时间由78h缩短为24h以内，省去了制备培养基、消毒和培养器皿的清洗处理等大量辅助性工作，随时可以打开包装进行抽样检测。 执行标准：食品安全国家标准 食品微生物检验大肠菌群计数MPN计数法（GB/T 4789.3--2010）。
适用于各类食品、饮料等样品中大肠菌群的快速测定。
2、操作方法
2.1、样品处理：按无菌操作称取样品25g（或25mL）放入含有225mL灭菌磷酸缓冲液稀释液（或生理盐水）的取样瓶或均质杯中，经充分振摇做成1：10的样品匀液。样品匀液的pH值应在6.5～7.5之间，必要时用1mol/L氢氧化钠或1mol/L盐酸调节。用1mL灭菌吸管吸取1：10样品匀液，注入含有9mL稀释液的试管内，振摇试管制成1：100的样品匀液。根据对样品污染状况的估计，按上述操作，一次制成10倍递增系列稀释样品匀液。每递增稀释1次，换一支1mL无菌吸管或吸头。从制备样品匀液至样品接种完毕，全过程不得超过15min。
2.2、接种
2.2.1、选取两个稀释度进行接种，普通食品一般采用1：10和1：100这两个稀释度，饮料采用原液和1：10两个稀释度。本品每份由三片大纸片（接10mL，袋中二片叠放算作一大片），六片小纸片（接1mL）组成。
2.2.2、用灭菌吸管吸取10mL 1：10样品匀液加到含有大纸片的塑料袋中（相当于接样品1g），吸透后平放，做三个重复。再用1mL灭菌吸管吸取1mL同一稀释度的样品匀液加到含有小纸片的塑料袋中（相当于接样品0.1g），做三个重复。再另取一支1mL灭菌吸管吸取1mL 1：100样品匀液加到含有小纸片的塑料袋中（相当于接样品0.01g），做三个重复。
2.3、培养：将接种好的纸片（可叠放）放入36℃±1℃培养箱中培养15～24h。
3、大肠菌群可能数（MPN）的报告
3.1 若纸片变黄或在黄色背景上呈现红色斑点为大肠菌群阳性纸片。纸片保持紫蓝色不变或在紫蓝色背景上呈现红色斑点，但周围没有黄色均为大肠菌群阴性纸片。
3.2 记录每个稀释度大肠菌群阳性纸片数，根据《食品饮料大肠菌群MPN表》查出相应的大肠菌群数。
3.3 如接种的个梯度为原液，应将表上查出的结果除以10。
4、注意事项
新的国家标准所用的单位改为每克（或毫升）检样中大肠菌群可能数，标准的接种量为0.333g（mL），MPN表也是由此而设计。而使用本品的标准接种量为3.33g（mL），大纸片接种10mL 1：10样品匀液相当于1g样品，因而表内数字应相应降低10倍。饮料样品的接种量为33.3mL，大纸片接种10mL样品原液，表内数字应降低100倍。
5、保存条件
本产品需存放在4℃～10℃冰箱中，保质期为一年，铝箔袋打开后,未用完的纸片要放回铝箔袋中封好，放到冰箱中，一个月内用完。在高湿度的环境中可能出现冷凝水，在拆封前将整包回温至室温。
食品、饮料大肠菌群（MPN）检索表
|
阳性纸片数 |
MPN |
95%可信限 |
阳性纸片数 |
MPN |
95%可信限 |
||||||
|
0.10 |
0.01 |
0.001 |
下限 |
上限 |
0.10 |
0.01 |
0.001 |
下限 |
上限 |
||
|
0 0 0 0 |
0 0 1 1 |
0 1 0 1 |
＜3.0 3.0 3.0 6.1 |
－ 0.15 0.15 1.2 |
9.5 9.6 11 18 |
2 2 2 2 |
2 2 2 3 |
0 1 2 0 |
21 28 35 29 |
4.5 8.7 8.7 8.7 |
42 94 94 94 |
|
0 0 1 1 |
2 3 0 0 |
0 0 0 1 |
6.2 9.4 3.6 7.2 |
1.2 3.6 0.17 1.3 |
18 38 18 18 |
2 3 3 3 |
3 0 0 0 |
1 0 1 2 |
36 23 38 64 |
8.7 4.6 8.7 17 |
94 94 110 180 |
|
1 1 1 1 |
0 1 1 2 |
2 0 1 0 |
11 7.4 11 11 |
3.6 1.3 3.6 3.6 |
38 20 38 42 |
3 3 3 3 |
1 1 1 1 |
0 1 2 3 |
43 75 120 160 |
9 17 37 40 |
180 200 420 420 |
|
1 1 2 2 |
2 3 0 0 |
1 0 0 1 |
15 16 9.2 14 |
4.5 4.5 1.4 3.6 |
42 42 38 42 |
3 3 3 3 |
2 2 2 2 |
0 1 2 3 |
93 150 210 290 |
18 37 40 90 |
420 420 430 1000 |
|
2 2 2 2 |
0 1 1 1 |
2 0 1 2 |
20 15 20 27 |
4.5 3.7 4.5 8.7 |
42 42 42 94 |
3 3 3 3 |
3 3 3 3 |
0 1 2 3 |
240 460 1100 ＜1100 |
42 90 180 420 |
1000 2000 4100 － |
|
注1：本表采用3个稀释度〔0.1g(或0.1ml)、0.01g（或0.01ml）、和0.001g（或0.001ml）〕，每个稀释度接种3片。 注2：表内所列检样量如改用1g(或1ml)、0.1g（或0.1ml）、和0.01g（或0.01ml）时，表内数字应相应降低10倍；如改用0.01g(或0.01ml)、0.001g（或0.001ml）、和0.0001g（或0.0001ml）时，则表内数字应相应增高10倍，其余类推。 |
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